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無菌操作的注意事項(xiàng)（2）
發(fā)布時(shí)間： 2024-05-28 點(diǎn)擊次數(shù)： 1210次我們這篇文章主要講述幾個(gè)常見實(shí)驗(yàn)操作的注意事項(xiàng)。包括：擦拭、加蓋、灼燒、移液；
01 擦拭
實(shí)驗(yàn)過程中需要擦拭的對象有工作臺(tái)面、手套、瓶皿/孔板表面、耗材/器械表面。
對于工作臺(tái)面，在實(shí)驗(yàn)開始前，結(jié)束后都需要試用70%乙醇擦拭，如果實(shí)驗(yàn)過程中出現(xiàn)液體滴落在臺(tái)面，也需要擦拭臺(tái)面后才能繼續(xù)實(shí)驗(yàn)；
對于手套，除了佩戴一次性滅菌處理過的手套外，整個(gè)實(shí)驗(yàn)過程都應(yīng)間隔一段時(shí)間就擦拭手套一次；
對于瓶皿/孔板，如果實(shí)驗(yàn)過程中被拿出過生物安全柜范圍以外，那么再次放回生物安全柜或培養(yǎng)箱之前，都應(yīng)該用70%乙醇進(jìn)行外表面擦拭；
對于耗材/器械表面，如果是一次性耗材，觸碰了實(shí)驗(yàn)臺(tái)面、或其他實(shí)驗(yàn)耗材/器械/手套等的外表面，都應(yīng)該扔棄不再試用；如果是非一次性的器械，出現(xiàn)上述誤觸，則應(yīng)該立即用70%乙醇擦拭整個(gè)可能被污染的區(qū)域。
02 加蓋
對于需要反復(fù)使用的含蓋的器皿，當(dāng)實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，清洗瓶蓋時(shí)，應(yīng)該注意清潔瓶蓋內(nèi)側(cè)，包括含橡膠墊的部分。
有條件的實(shí)驗(yàn)室，可以在器皿蓋上蓋子后，使用70%乙醇擦拭外表面，然后再通過外層包裹錫箔紙的方式，來盡可能降低外部環(huán)境灰塵沉積在蓋子和器皿之間縫隙的現(xiàn)象。
03 灼燒
灼燒是一種可以去除顆粒性灰塵或棉絨的有效辦法，火焰也會(huì)造成附近的氣流上升，避免灰塵沉降。
但是，在生物安全柜內(nèi)，點(diǎn)燃酒精燈進(jìn)行灼燒是不合適的。
生物安全柜工作時(shí)，會(huì)為內(nèi)部空間提供一個(gè)穩(wěn)定的層流，但酒精燈的火焰會(huì)對它產(chǎn)生干擾，進(jìn)而影響內(nèi)部的無菌環(huán)境，提高了生物污染的風(fēng)險(xiǎn)。
04 移液
移液部分，我們分為小體積移液、大體積移液和溶液傾倒轉(zhuǎn)移來講解。
對于小體積移液，一般特指小于1mL的液體轉(zhuǎn)移，因?yàn)槠潴w積小，通常需要使用移液器來操作。
而小體積的移液吸頭比較短，在吸液的過程中有可能出現(xiàn)移液器下端也進(jìn)入瓶皿內(nèi)部的情況。
此時(shí)就需要特別注意，不能讓移液器碰觸到瓶皿內(nèi)壁，如果碰觸了，則應(yīng)該立即使用70%乙醇清潔移液器下端，然后才可以繼續(xù)往下進(jìn)行實(shí)驗(yàn)操作。
對于大體積移液，例如5/10/25mL或以上的液體轉(zhuǎn)移，可以用大量程的移液吸頭或大量程的電動(dòng)移液器輔助移液。
但不管是什么體積的移液，都應(yīng)該確保吸頭或移液管的末端內(nèi)是含有棉花或透氣膠塞的，這樣可以有效避免因?yàn)橐埔哼^程中，液體吸入移液器內(nèi)部造成污染。
但由于大體積移液的液體轉(zhuǎn)移速度快、量大，有時(shí)候即使有棉花，也會(huì)出現(xiàn)液體被吸入移液器內(nèi)的現(xiàn)象，這時(shí)就只能停止實(shí)驗(yàn)，或改用其他未被污染的移液器來操作了。
關(guān)于溶液傾倒，有時(shí)液體的轉(zhuǎn)移不需要特別精準(zhǔn)，會(huì)把溶液從一個(gè)瓶內(nèi)直接倒入另一個(gè)瓶內(nèi)或管內(nèi)。
在操作時(shí)，需要注意溶液從原來的容器中倒入新的容器時(shí)，瓶口應(yīng)保持懸空，而不是直接接觸新容器的瓶口邊緣來完成液體轉(zhuǎn)移。
因?yàn)楹笳邥?huì)容易出現(xiàn)液橋，即液體在兩個(gè)挨得很近的接觸面之間形成的水柱，這樣的水柱容易被微生物進(jìn)入；同時(shí)，在傾倒的時(shí)候也要注意不要讓液體流淌在容器的外表面，因?yàn)檫@樣也會(huì)提高微生物污染的風(fēng)險(xiǎn)。
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